2024-09-11
Abstrak
Tujuan: Penentuan Salidroside dalam Farmasi dengan Kromatografi Cairan Berkinerja Tinggi (HPLC)
Metode: Kolom C18, 4,6*250mm, 5μm;
Panjang gelombang: 275nm;
Fase mobile A: air; fase mobile B: metanol;
Tingkat aliran 1,0 ml/menit;
Suhu: 30°C;
Volume injeksi: 5μl.
Sebuah kurva standar ditetapkan dan isi target dihitung dengan metode standar eksternal.
Kata kunci: HPLC, Detektor UV, Herbal, Salidroside
1Metode percobaan
1.1 Konfigurasi instrumen
Wayeal LC3200 Seri HPLC
Tidak, tidak. | Nama | Qty |
1 | HPLC seri LC3200 | 1 |
2 | P3200 Pompa biner | 1 |
3 | Detektor UV3200 | 1 |
4 | CT3200 Oven Kolom | 1 |
5 | AS3200 Autosampler | 1 |
Tabel 1 Konfigurasi sistem HPLC
1.2 Kondisi pengujian
Kolom: C18, 5μm, 4,6*250mm
Suhu: 30°C
Panjang gelombang: 275nm
Tingkat aliran: 1,0 ml/menit
Fase bergerak: A: air; B: metanol
Volume injeksi: 5μL
Kondisi gradien:
T (menit) | A Air (%) | B Metanol (%) |
0 | 95 | 5 |
15 | 90 | 10 |
35 | 85 | 15 |
36 | 95 | 5 |
50 | 95 | 5 |
1.3 Instrumen, Reagen dan Bahan Konsumsi
Reagen: air ultra murni, Metanol ((GR)
Standar: Salidroside (99,7%)
Perangkat bantu: keseimbangan kimia; filter pelarut; pembersih ultrasonik
Bahan percobaan: membran filter: membran filter fase berair 0,45μm
1.4 Persiapan Solusi
1.4.1 Solusi standar: Ambil jumlah salidroside standar yang sesuai ke dalam kolob volumetrik dan larut dalam metanol sehingga konsentrasi 0,0084125mg/mL, 0,016825mg/mL, 0,03365mg/mL, 0,025 mg/mL, 0,016825mg/mL, 0,016825mg/mL, 0,016825mg/mL, 0,016825mg/mL, 0,016825mg/mL, 0,016825mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168mg/mL, 0,0168 mg/mL, 0,0168 mg/mL, 0,0168 mg/mL, 0,03365 mg/mL, 0,03365 mg/mL, 0,00673mg/ml, 0, 1346 mg/ ml, 0, 2692 mg/ ml, 0, 673 mg/ ml.
1.4.2 Persiapan Sampel: Ambil 1,0022 g sampel 1 ke dalam kolong volumetrik, tambahkan metanol dan larut sampai 25 ml. Ambil 1,0794 g sampel 2 ke dalam kolong volumetrik, tambahkan metanol dan larut sampai 25 ml.
2 Hasil dan Pembahasan
2.1 Kesesuaian Sistem
Gambar 1 Kromatogram Standar Salidroside
Tidak. | Komposisi | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Ketinggian puncak | Faktor Belakang | Nomor Plat Teoritis |
1 | Salidroside | 36.262 | 812.469 | 31.885 | 1.035 | 45724 |
Tabel 2 Parameter Kromatografi Standar Salidroside
Analisis: Hasil uji salidroside baik dengan puncak simetris dan jumlah plat teoretis yang tinggi.
2.2 kurva standar
Gambar 2 Kromatogram yang ditumpuk dari larutan Salidroside Standard
Gambar 3 Persamaan kurva dan koefisien korelasi larutan standar Salidroside
Analisis: kisaran linier kurva standar salidroside baik, r> 0.999.
2.3 Kemungkinan diulang
Gambar 4 Kromatogram Repeatability dari Standar Salidroside (n=6)
Tidak. | Sampel | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak |
1 | 0.2692mg/L larutan standar | 36.265 | 807.365 |
2 | 36.262 | 812.469 | |
3 | 36.247 | 812.562 | |
4 | 36.224 | 815.145 | |
5 | 36.228 | 813.374 | |
6 | 36.272 | 814.529 | |
Rata-rata | 36.250 | 812.574 | |
RSD (%) | 0.055 | 0.340 |
Tabel 3 Repeatability Chromatographic Parameters Tabel Salidroside (n=6)
Analisis: 6 suntikan 0, 2692 mg/ L salidroside menunjukkan reproduksi yang baik dan nilai RSD dari waktu retensi adalah 0, 055% dan nilai RSD dari area puncak adalah 0, 340%.
2.4 Sampel 1
Gambar 5 Kromatogram Sampel 1
Tidak. | Komponen | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Ketinggian puncak | Faktor Belakang | Nomor Plat Teoritis | konsentrasi |
1 | Salidroside | 36.201 | 185.337 | 7.335 | 1.038 | 47306 | 0.061933 mg/L |
Tabel 4 Parameter kromatografi sampel 1
Analisis: Kandungan salidroside dalam sampel 1 adalah 0,061933 mg/L, yang dihitung menurut persamaan kurva standar.
2.5 Sampel 2
Gambar 6 Kromatogram sampel 2
Tidak. | Komposisi | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Ketinggian puncak | Faktor Belakang | Nomor Plat Teoritis | konsentrasi |
1 | Salidroside | 36.214 | 197.232 | 7.750 | 0.998 | 46217 | 0.065566 |
Tabel 4 Parameter kromatografi sampel 2
Analisis: Kandungan salidroside dalam sampel 2 adalah 0,065566mg/L, yang dihitung menurut persamaan kurva standar.
3Kesimpulan
Wayeal LC3200 seri kromatografi cair berkinerja tinggi dengan detektor UV digunakan untuk mendeteksi salidroside; hasil tes baik dengan puncak simetris dan nomor plat teoritis yang tinggi.Jangkauan linier kurva standar baik, r>0.999Repeatability baik dan 6 suntikan 0, 2692 mg/ L salidroside memiliki reproduksi yang baik dan nilai RSD dari waktu retensi adalah 0, 055% dan nilai RSD dari area puncak adalah 0, 340%.Kandungan salidroside dalam sampel 1 adalah 00,061933 mg/L, dan kandungan salidroside dalam sampel 2 adalah 0,065566 mg/L, yang dihitung menurut persamaan kurva standar.
Kirim pertanyaan Anda langsung ke kami