2024-09-27
Penentuan polietilen glikol dengan kromatografi permeasi gel
1. Pengantar
Tujuan: Penentuan berat molekul dan distribusi polietilen glikol (PEG) dengan metode kromatografi permeasi gel kinerja tinggi (GPC).
Metode:
Xtimate SEC-120, 5 μm, 7,8x300 mm kolom kromatografi permeasi gel
Detektor indeks difraksi diferensial (RID)
Fase mobile: air ultra murni
Tingkat aliran: 1,0 ml/menit
Suhu kolom: 35 °C;
Volume injeksi: 10μl.
Kurva kalibrasi ditetapkan dan massa molekul dan hasil distribusi dari setiap sampel dihitung oleh perangkat lunak GPC.
Hasil: Linearitas PEG baik ketika berat molekul berada dalam kisaran 400-20000. Reproduksi eksperimen baik, dengan 6 suntikan berturut-turut PEG6000,nilai RSD dari waktu retensi adalah 00,105%, dan nilai RSD dari area puncak adalah 0,335%.
Kesimpulan: Kromatografi permeasi gel berkinerja tinggi (GPC) adalah metode yang dapat diandalkan untuk penentuan berat molekul dan distribusi PEG,yang memiliki keunggulan akurasi dan reproduksi yang tinggi ketika digunakan untuk mengevaluasi sifat polydispersitas senyawa polimer.
Kata kunci: HPLC, GPC, RID, Polimer, Poliethylene Glycol
2Metode percobaan
2.1 Konfigurasi instrumen
Tabel 1 Daftar Konfigurasi Kromatograf Cairan Berkinerja Tinggi
Tidak. | Modular | Qty |
1 | Kromatografi Cairan Berkinerja Tinggi Seri LC3200 | 1 |
2 | PB3200 Pompa Biner | 1 |
3 | RID3300 | 1 |
4 | CT3200 Oven Kolom | 1 |
5 | AS3200 Autosampler | 1 |
2.2 Kondisi pengujian
Kolom kromatografi: Xtimate SEC-120,5μm,7,8x300mm
Suhu kolom: 35°C
Detektor:
Tingkat aliran: 1,0 ml/menit
Fase Mobile: Air
Volume injeksi: 10μL
2.3 Instrumen/Reagen dan Bahan Konsumsi
Reagen:
Air Ultra Murni
Standar: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
Peralatan Bantuan
Timbangan Analisis
Unit Ekstraksi Pelarut
Pembersih Ultrasonik
Bahan Percobaan
Membran Filter: Membran filter berair 0,45μm
2.4 Penyusunan Standar PEG
Pipet 0,20 g masing-masing dari standar PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 dan PEG20000, tambahkan 10 ml air untuk dibubarkan, aduk dengan baik, dan siapkan konsentrasi sampel 20 mg/ml untuk diuji.
3Hasil dan Diskusi
3.1 Standar berat molekul yang berbeda
Gambar 1 Kromatogram PEG400
Tabel 1 Parameter Kromatografi PEG400
Tidak. | Senyawa | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Nomor pelat teriacal | Faktor Belakang |
1 | PEG400 | 10.315 | 501.732 | 2346 | 1.185 |
Tabel 2 Parameter Kromatografi dari PEG2000
Tidak. | Senyawa | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Nomor Plat Teoritis | Faktor Belakang |
1 | PEG2000 | 8.659 | 499.892 | 1926 | 1.230 |
Gambar 3 Kromatogram PEG6000
Tabel 3 Parameter Kromatografi dari PEG6000
Tidak. | Senyawa | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Nomor Plat Teoritis | Faktor Belakang |
1 | PEG6000 | 7.215 | 499.482 | 1.171 |
Gambar 4 Kromatogram PEG10000
Tabel 4 Parameter kromatografi dari PEG10000
Tidak. | Senyawa | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Nomor Plat Teoritis | Faktor Belakang |
1 | PEG10000 | 6.612 | 483.657 | 2550 | 1.265 |
Gambar 5 Kromatogram PEG20000
Tabel 5 Parameter kromatografi dari PEG20000
Tidak. | Senyawa | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Nomor Plat Teoritis | Faktor Belakang |
1 | PEG20000 | 6.081 | 497.803 | 1103 | 1.799 |
Gambar 6 Kromatogram tumpang tindih dengan berat molekul yang berbeda
Catatan: Data di atas menunjukkan bahwa waktu retensi PEG20000 adalah 6,081 menit, dan PEG400 adalah 10,315 menit, molekul yang lebih besar dielusi terlebih dahulu dan molekul yang lebih kecil dielusi kemudian.
3.2 Kemungkinan diulang
Gambar 7 Kromatogram Tindih Repeatability dari PEG6000 (n=6)
Tabel 7 Parameter kromatografi repeatability dari PEG6000 (n=6)
Tidak. | Sampel | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak |
1 | 6000 | 7.233 | 498.821 |
2 | 6000 | 7.234 | 503.367 |
3 | 6000 | 7.225 | 499.891 |
4 | 6000 | 7.221 | 499.560 |
5 | 6000 | 7.219 | 501.374 |
6 | 6000 | 7.215 | 499.482 |
Rata-rata | - | 7.225 | 500.416 |
RSD (%) | - | 0.105 | 0.335 |
Catatan: Repeatability baik. RSD waktu retensi adalah 0, 105% dan RSD area puncak adalah 0, 335% untuk 6 suntikan PEG6000.
3.3 kurva standar
Gambar 8 Kurva Standar Kromatogram dari bobot molekul yang berbeda
Tabel 8 Kurva Standar Parameter Kromatografi dari Berat Molekuler yang Berbeda
Catatan: Hasil berat molekul dan distribusi dari setiap sampel dihitung oleh perangkat lunak GPC.000, dan koefisien korelasi linier adalah 0.999.
4Kesimpulan
Uji poliethylene glycol (PEG) ini dilakukan dengan kromatografi gel dengan menggunakan kromatografi cair berkinerja tinggi seri LC3200 dengan detektor indeks bias diferensial.waktu retensi PEG20000 adalah 6.081 menit, dan PEG400 adalah 10.315 menit, molekul yang lebih besar dielusi terlebih dahulu dan molekul yang lebih kecil dielusi kemudian.105% dan RSD dari area puncak adalah 0.335% untuk 6 suntikan PEG6000. linearitas berat molekul PEG baik dalam kisaran 400 sampai 20,000, dan koefisien korelasi linier adalah 0.9999. Kromatografi permeasi gel berkinerja tinggi (GPC) adalah metode yang dapat diandalkan untuk penentuan berat molekul dan distribusi PEG,yang memiliki keunggulan hasil yang akurat dan dapat direproduksi ketika digunakan untuk mengevaluasi sifat polydispersitas senyawa polimer.
Catatan: Sampel harus dibiarkan pada suhu kamar selama lebih dari 12 jam dan harus dicampur dengan lembut, jangan menggunakan ultrasonik atau goyangkan dengan kuat untuk mempercepat larutan.
Kirim pertanyaan Anda langsung ke kami