2024-10-22
Penentuan 6-metilkumarin dalam kosmetik dengan kromatografi cair
1.1 Konfigurasi instrumen
Tabel 1 Daftar Konfigurasi Kromatografi Cairan
Tidak, tidak. | Modul | Qty |
1 | PB3210 Pompa Biner | 1 |
2 | CT3400 Oven Kolom | 1 |
3 | AS3210 Autosampler | 1 |
4 | Detektor UV3210 | 1 |
5 | NovaChrom SC18 4,6*250mm, 5μm | 1 |
6 | SmartLab Workstation | 1 |
1.2 Metode percobaan
1.2.1 Reagen
Tabel 2 Daftar Reagen
Tidak, tidak. | Reagen | Kemurnian |
1 | Metanol | Kelas Kromatografi |
2 | 6-metilkumarin | 99% |
3 | Amonium dihidrogen fosfat | AR |
4 | Asam fosfat | GR |
1.2.1.1 larutan baku 6-metilkumarin (1000mg/L): Ambil jumlah yang tepat dari 6-metilkumarin standar,larut dan tetapkan volume dengan metanol dan disiapkan menjadi konsentrasi 1000mg/L larutan baku standar.
1.2.1.2 larutan kerja standar 6-metilkumarin:Pipet jumlah yang tepat dari larutan baku 6-metilkumarin dan diencerkan dengan metanol untuk menyiapkan serangkaian kurva kerja dengan konsentrasi 0.1mg/L, 0.5mg/L, 1.0mg/L, 3.0mg/L, 5.0mg/L dan 10.0mg/L masing-masing.
1.2.1.3 Natrium dihidrogen fosfat larutan penyangga: Ambil 3,12 g natrium dihidrogen fosfat, tambahkan air untuk larut dan encer hingga 1000 ml, dan sesuaikan pH asam fosforik menjadi 3.5.
1.2.2 Kondisi Kromatografi
Tabel 3 Kondisi Kromatografi
Kolom kromatografi | NovaChrom SC18 4,6*250mm 5μm | ||
Fase Mobile | A: Metanol,B:Sodium dihidrogen fosfat larutan penyangga | ||
Tingkat Aliran | 1 ml/menit | ||
Suhu Kolom | 35°C | Panjang gelombang | 275nm |
Volume suntikan | 10μL |
Tabel 4 Program Eluasi Gradien
Waktu (menit) | Fase mobile A | Fase B yang bergerak |
0 | 55 | 45 |
11 | 55 | 45 |
12 | 90 | 10 |
40 | 90 | 10 |
41 | 55 | 45 |
50 | 55 | 45 |
1.2.3 Pengolahan sampel sebelumnya
Ambil 1 g (tekun hingga 0,001 g) sampel dalam kolang volumetrik 10 mL, tambahkan 5 mL metanol, pusing dan goyang untuk mencampur sampel dengan larutan ekstraksi, ekstraksi ultrasonik selama 20 menit,didinginkan hingga suhu kamar, dan kemudian menetapkan volume menjadi 10 ml dengan metanol, dicampur dan kemudian dipindahkan ke tabung sentrifugal, sentrifugasi pada 5000 r/menit selama 5 menit,dan supernatant disaring melalui 0.45μm membran organik, dan kemudian untuk diuji.
2Hasil percobaan.
2.1 Kesesuaian Sistem
Gambar 1 10mg/L Kromatogram Standar
Tabel 5 Data pengujian standar 10 mg/L
Senyawa | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Nomor Plat Teoritis |
6-metilkumarin | 11.168 | 574.285 | 15854 |
Catatan:Kromatogram dan data menunjukkan bahwa 6-metilkumarin memiliki bentuk puncak yang baik, dan tidak ada puncak lain di sekitar puncak target, dan jumlah plat teoretisnya tinggi,yang memenuhi persyaratan eksperimen.
2.2 kurva standar
Gambar 2 Hasil pengujian kurva standar
Catatan: Kromatogram menunjukkan bahwa nilai R dari koefisien korelasi kurva 6-metilkumarin lebih dari 0.9999, yang memenuhi persyaratan eksperimen.
2.3 Kemungkinan diulang
Gambar 3 Kromatogram Repeatability 3mg/L Standar 6 Injeksi
Tabel 6 Data Repeatability dari 3mg/L Standar 6 InjeksiTabel 6 Data Repeatability dari 3mg/L Standar 6 Injeksis
6-metilkumarin |
Tidak, tidak. | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak |
1 | 11.159 | 177.710 | |
2 | 11.161 | 176.711 | |
3 | 11.142 | 177.128 | |
4 | 11.152 | 176.985 | |
5 | 11.150 | 177.469 | |
6 | 11.149 | 177.629 | |
RSD (%) | 0.061 | 0.222 |
Catatan: Menurut data dalam tabel di atas, RSD dari pengulangan waktu retensi 6-metilkumarin adalah 0,061%, dan RSD dari pengulangan area puncak adalah 0,222%.Kemampuan mengulangi baik dan memenuhi persyaratan eksperimental.
2.4 Batas Deteksi
Gambar 4 Test Chromatogram of 0.02mg/L Standar
Tabel 7 Data pengujian standar 0,02 mg/L
Senyawa | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | SNR |
6-metilkumarin | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
Catatan: Menurut data di atas, 3 kali rasio sinyal-ke-bising dihitung sebagai batas deteksi, dan ditemukan bahwa batas deteksi 6-metilkumarin adalah 0,004mg/L.Ini memenuhi persyaratan eksperimen.
2.5 Hasil pengujian sampel kosmetik
Gambar 5 Kromatogram pengujian sampel kosmetik
Catatan: 6-Methylcoumarin tidak terdeteksi dalam sampel kosmetik.
2.6 Perhatian
Saat menggunakan sentrifugal berkecepatan tinggi, pastikan tabung ditempatkan secara simetris dan massa total tabung di sisi yang berlawanan sama.
3Kesimpulan
Metode analisis yang diperkenalkan dalam artikel ini, dengan merujuk pada Standar Keamanan dan Teknis untuk Kosmetik dalam deteksi 6-metilkumarin,dengan menggunakan Wayeal kinerja tinggi kromatografi cair seri LC3200 dengan detektor UVHasil percobaan menunjukkan bahwa bentuk puncak 6-metilkumarin baik dalam tes kemampuan beradaptasi sistem, dan tidak ada puncak lain di sekitar puncak target,dan nomor plat teoretis tinggiNilai koefisien korelasi kurva R di atas 0.9999RSD dari pengulangan waktu retensi 6-metilkumarin adalah 0,061%, dan RSD dari pengulangan area puncak adalah 0,222%, yang menunjukkan pengulangan yang baik..004mg/L. Semua hasil tes di atas memenuhi persyaratan instrumen dalam metode standar.
Kirim pertanyaan Anda langsung ke kami