2024-09-05
Penentuan alkohol gula dalam makanan dengan kromatografi cair berkinerja tinggi
1Metode dan Prinsip
Ditentukan dengan kromatografi cair berkinerja tinggi dengan detektor RID dan diukur secara kuantitatif dengan metode standar eksternal.
2Konfigurasi Instrumen dan Metode Percobaan
2.1 Konfigurasi instrumen
Tidak, tidak. | Konfigurasi Sistem | Qty |
1 | P3210B Pompa gradien tekanan tinggi biner | 1 |
2 | CT3210 Oven Kolom | 1 |
3 | AS3210 Autosampler | 1 |
4 | Detektor RI | 1 |
5 | 4.6*250mm 5μm Amino Column | 1 |
6 | SmartLab Workstation | 1 |
Tabel1 Daftar konfigurasi
2.2 Metode Percobaan
2.2.1 Persiapan Reagen dan Standar
Tidak, tidak. | Reagen | Kemurnian |
1 | Acetonitril | Kromatografi murni |
2 | 4 jenis standar campuran pemanis | 40 g/L |
Tabel 2 Daftar Reagen dan Standar
Kurva standar: Standar campuran (40 mg/ml) dari empat pemanis diencerkan dengan air hingga konsentrasi 1,6 mg/ml, 2,4 mg/ml, 3,2 mg/ml, 4,0 mg/ml, 4,8 mg/ml.Seri kurva kerja konsentrasi 0 mg/mL.
2.22 Kondisi Kromatografi
Kolom kromatografi | Kolom amino, 4,6*250mm, 5μm | ||
Fase Mobile | Acetonitrile: Air=80:20 | ||
Tingkat Aliran | 1 ml/menit | ||
Suhu | 30°C | Suhu Sel | 40°C |
Volume suntikan | 20μL |
Tabel 3 Kondisi Kromatografi
2.2.3 Pengolahan sampel sebelumnya
Sampel minuman non-protein harus tidak kurang dari 200 ml dan ditempatkan ke dalam wadah kedap udara setelah dicampur sepenuhnya.dan tetapkan volume menjadi 50 ml dengan air, goyangkan dengan baik dan dideteksi pada mesin setelah melewati membran filter 0,22μm.
3. Hasil percobaan
3.1 Kesesuaian Sistem
Gambar 1 Kromatogram standar pencampuran pemanis 6,0 mg/mL
Catatan:Seperti yang ditunjukkan pada gambar, ada puncak bentuk yang baik dari eritritol, xilitol, sorbitol dan maltitol, dan tidak ada puncak lain di sekitar puncak target, yang memenuhi persyaratan eksperimen.
3.2 Linearitas
Gambar 2 kurva standar eritritol
Gambar 3 kurva standar xilitol
Gambar 4 kurva standar sorbitol
Gambar 5 kurva standar maltosa
Konsentrasi kurva standar pencampuran dari empat pemanis adalah 1,6 mg/mL, 2,4 mg/mL, 3,2 mg/mL, 4,0 mg/mL, 4,8 mg/mL dan 6,0 mg/mL.koefisien korelasi linier dari kurva standar empat pemanis di atas 0.999, yang memenuhi persyaratan eksperimen.
3.3 Kemungkinan diulang
Gambar 6 Kromatogram Repeatability dari 6 Injeksi dari 3,2 mg/ml Standar Campuran Pemanis
Waktu Penyimpanan |
Tidak, tidak. |
Erythritol |
Xylitol |
Sorbitol |
Maltitol |
1 |
8.407 |
11.365 |
15.637 |
36.644 |
|
2 |
8.414 |
11.374 |
15.638 |
36.658 |
|
3 |
8.415 |
11.377 |
15.644 |
36.645 |
|
4 |
8.412 |
11.374 |
15.638 |
36.635 |
|
5 |
8.426 |
11.391 |
15.670 |
36.696 |
|
6 |
8.436 |
11.405 |
15.680 |
36.701 |
|
RSD (%) |
0.128 |
0.128 |
0.120 |
0.077 |
Tabel 4 6 Injeksi Pengulangan Waktu Retensi
Daerah puncak |
Tidak, tidak. | Erythritol | Xylitol | Sorbitol | Maltitol |
1 | 228.976 | 239.243 | 234.601 | 224.837 | |
2 | 230.029 | 238.083 | 239.130 | 224.900 | |
3 | 224.656 | 237.784 | 236.914 | 222.373 | |
4 | 227.415 | 239.595 | 238.192 | 222.414 | |
5 | 227.455 | 240.591 | 238.963 | 223.679 | |
6 | 228.492 | 239.876 | 237.412 | 227.865 | |
RSD (%) | 0.809 | 0.450 | 0.705 | 0.913 |
Tabel 5 6 Injeksi Peak Area Repeatability
Catatan: Seperti yang ditunjukkan tabel, waktu retensi RSD eritritol, xilitol, sorbitol dan maltitol adalah 0,128%, 0,128%, 0,120%, 0,077%, dan pengulangan waktu retensi kurang dari 0,2%,yang memenuhi persyaratan eksperimenRSD daerah puncak eritritol, xilitol, sorbitol dan maltitol adalah 0,809%, 0,450%, 0,705% dan 0,913%.yang memenuhi persyaratan eksperimen.
3.4 Batas Deteksi
Gambar 7 Kromatogram Standar Campuran Pemanis 1,6 mg/ml
Catatan: Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 7, konsentrasi campuran pemanis 1,6 mg/ml standar, SNR tiga kali lipat dihitung dari batas deteksi eritritol, xilitol, sorbitol, dan maltitol adalah 0.01 mg/ml, 0,012 mg/mL, 0,015 mg/mL, dan 0,03 mg/mL, yang memenuhi persyaratan eksperimen.
3.5 Minuman Non-protein bermerek
Gambar 8 Kromatogram minuman bermerek dalam 2 suntikan
Sampel | Daerah puncak |
Sampel-1 | 209.594 |
Sampel-2 | 209.001 |
Nilai Rata-rata Aritmatika | 209.298 |
Tabel 6 2 Injeksi untuk Minuman Bermerek
Seperti yang ditunjukkan kromatogram, eritritol terdeteksi dalam minuman bermerek dan xylitol, sorbitol dan maltitol tidak terdeteksi.Data dalam tabel adalah hasil dari dua tes dengan perbedaan mutlak 0.0,14% dari rata-rata aritmatika, yang kurang dari 10% dari persyaratan standar.
3.6 Perhatian
Karena detektor indeks difraksi diferensial sensitif terhadap kepadatan larutan, disarankan bahwa fase mobile dicampur sebelumnya saat melakukan percobaan.
4 Kesimpulan
Metode analisis yang diperkenalkan dalam artikel ini mengacu pada standar nasional GB 5009.279-2016 (Tentukan xilitol, sorbitol, maltitol dan eritritol dalam makanan),dengan menggunakan Wayeal seri LC3200 kromatograf cair kinerja tinggi dengan detektor RIDHasil percobaan menunjukkan bahwa sistem adaptif pengujian erythritol, xylitol, sorbitol dan maltitol, puncak baik dan tidak ada puncak lain di sekitar puncak target.RSD untuk waktu retensi adalah 0.128%, 0.128%, 0.120%, dan 0.077%, semuanya kurang dari 0.2%. RSD area puncak adalah 0.809%, 0.450%, 0.705%, 0.913% dan kurang dari 1%. SNR = 3 sebagai batas deteksi, maka batas deteksi eritritol,xylitol, sorbitol, dan maltitol adalah 0,01 mg/mL, 0,012 mg/mL, 0,015 mg/mL, dan 0,03 mg/mL. Perbedaan absolut antara kedua pengukuran adalah 0,14% dari rata-rata aritmatika,yang kurang dari 10% dari persyaratan standarSemua data di atas menunjukkan bahwa hasilnya memenuhi persyaratan eksperimen.
Kirim pertanyaan Anda langsung ke kami