2024-08-22
Metode analisis yang diperkenalkan dalam artikel ini, dengan merujuk pada edisi 2020 Farmakopea Republik Rakyat Tiongkok dalam metode uji Acyclovir,dengan menggunakan Wayeal high performance liquid chromatograph seri LC3200 dengan detektor DAD.
1Konfigurasi Instrumen dan Metode Percobaan
2.1 Konfigurasi instrumen
Tidak. | Nama | Qty |
1 | P3210Q Pompa Kuarter | 1 |
2 | CT3400 Oven Kolom | 1 |
3 | AS3210 Autosampler | 1 |
4 | DAD3260 DAD Detektor | 1 |
5 | Nova Atom PC18 4,6x250mm 5μm | 1 |
6 | Stasiun Kerja Kromatografi | 1 |
2.2 Metode percobaan
2.2.1 Reagen Persiapan
Tabel 2 Daftar Reagen
Tidak. | Reagen | Kemurnian |
1 2 3 4 5 |
Metanol Asam fosfat Natrium hidroksida Acyclovir Guanin |
Kemurnian Kromatografi ((LC) GR MOS 98% 99% |
2.2.1.1 Solusi uji: Ambil 40 mg sampel ke dalam kolang pengukuran 200 ml, tambahkan 2 ml natrium hidroksida 0,4% untuk membubarkannya, kemudian tambahkan 25 ml 0.1% (V/V) larutan asam fosfor dan encerkan dengan air sampai skala, goyangkan dengan baik.
2.2.1.2 Larutan referensi: Ambil 1 ml larutan uji ke dalam kolang pengukuran 100 ml, tambahkan 5 ml larutan asam fosfor 0,1%, encerkan dengan air hingga berskala dan goyangkan dengan baik.
2.2.1.3 Solusi penyimpanan kontrol guanin: Ambil 10 mg guanin referensi ke dalam kolang pengukuran 50 mL, tambahkan 5 mL larutan 0,4% natrium hidroksida untuk membubarkannya, kemudian tambahkan 5 mL 0.1% larutan asam fosfat, diencerkan dengan air sampai skala, goyangkan dengan baik.
2.2.1.4 Larutan referensi guanin: Ambil 1 ml larutan penyimpanan referensi guanin ke dalam kolong 100 ml, encerkan dengan air dan goyangkan dengan baik.
2.2.1.5 Solusi kesesuaian sistem: Ambil jumlah yang tepat dari masing-masing larutan referensi dan larutan referensi guanin, aduk dalam volume yang sama dan goyangkan dengan baik.
2.2.2 Kondisi Kromatografi
Tabel 3 Kondisi Kromatografi
Kolom kromatografi | Nova Atom PC18 Kolom Kromatografi, 4,6*250mm, 5μm | ||
Fase Mobile | Fase A: Air | Fase B: Metanol | |
Tingkat Aliran | 1 ml/menit | ||
Suhu Kolom | 35°C | Panjang gelombang | 254nm |
Volume suntikan | 20μL |
Tabel 4 Rasio Fase Mobile
Waktu (menit) | Fase mobile A | Fase B yang bergerak |
0 | 94 | 6 |
15 | 94 | 6 |
40 | 65 | 35 |
41 | 94 | 6 |
51 | 94 | 6 |
3Hasil percobaan.
3.1 Solusi Kesesuaian Sistem
Gambar 1 Test Chromatogram of System Suitability Solution
Tabel 5 Solusi Kesesuaian Sistem Data Uji
Tidak. | Komposisi | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Nomor plat teoretis | Perpisahan |
1 | Guanin | 5.698 | 138.675 | 17173 | 12.334 |
2 | Acyclovir | 8.425 | 139.902 | 15786 | N.a. |
Catatan: Dari grafik di atas dan data dalam tabel, dapat dilihat bahwa Acyclovir dan Guanine memiliki bentuk puncak yang lebih baik dan jumlah plat teoretis yang tinggi.0, yang memenuhi persyaratan dalam farmakopea.
3.2 Kemungkinan diulang
Gambar 2 Kromatogram Kemampuan Ulangi 6 Injeksi Kesesuaian Sistem
Tabel 6 Data pengulangan dari 6 suntikan kesesuaian sistem Waktu retensi larutan
Sampel | Tidak. | Guanin | Acyclovir |
Waktu Penyimpanan |
1 | 5.698 | 8.408 |
2 | 5.701 | 8.415 | |
3 | 5.705 | 8.411 | |
4 | 5.701 | 8.405 | |
5 | 5.705 | 8.401 | |
6 | 5.705 | 8.398 | |
RSD (%) | 0.048 | 0.074 |
Tabel 7 Data pengulangan dari 6 suntikan larutan kesesuaian sistem
Sampel | Tidak. | Guanin | Acyclovir |
Daerah puncak |
1 | 136.997 | 138.836 |
2 | 138.496 | 139.117 | |
3 | 137.783 | 139.505 | |
4 | 136.663 | 138.204 | |
5 | 137.755 | 137.968 | |
6 | 137.789 | 139.374 | |
RSD (%) | 0.475 | 0.452 |
Catatan: Menurut data dalam tabel di atas, RSD waktu retensi guanin dan acyclovir dalam larutan kesesuaian sistem adalah 0,048% dan 0,074%, dan RSD area puncak adalah 0,475% dan 0.452%Hasil reproduksi adalah baik dan memenuhi persyaratan eksperimen.
3.3 Solusi pengujian
Gambar 3 Kromatogram sampel uji
Tabel 8 Data uji sampel uji
Sampel | Komposisi | Waktu Penyimpanan | Daerah puncak | Ketinggian puncak | Nomor plat teoretis |
Sampel pengujian | Acyclovir | 8.385 | 22385.51 | 1806.31 | 10082 |
Catatan: Menurut kromatogram di atas dan data yang ditampilkan, tidak ada puncak lain dalam kromatogram sampel uji, dan bentuk puncaknya baik, jumlah plat teoretisnya tinggi,yang memenuhi persyaratan batas farmakopea di bawah item guanin dan zat lain dalam metode uji acyclovir.
3.4 Catatan
Natrium hidroksida sangat korosif, jadi berhati-hatilah saat menyiapkan larutan.
4Kesimpulan
Metode analisis yang diperkenalkan dalam artikel ini, dengan merujuk pada edisi 2020 Farmakopea Republik Rakyat Tiongkok dalam metode uji Acyclovir,dengan menggunakan Wayeal high performance liquid chromatograph seri LC3200 dengan detektor DADHasil percobaan menunjukkan bahwa acyclovir dan guanin memiliki bentuk puncak yang lebih baik dan jumlah pelat teoretis yang tinggi.0Waktu retensi RSD untuk guanin dan acyclovir dalam larutan kesesuaian sistem adalah 0,048% dan 0,074%, dan area puncak RSD adalah 0.475% dan 0Hasil repeatability baik dan memenuhi persyaratan eksperimen.Tidak ada puncak lain dalam kromatogram sampel uji dan bentuk puncaknya baik dan jumlah plat teoretisnya tinggi, yang memenuhi persyaratan Farmakopea untuk batas metode uji Acyclovir di bawah item guanin dan zat lainnya.
Kirim pertanyaan Anda langsung ke kami