Penentuan residu antibiotik quinolone dalam daging ayam dengan Wayeal's LCMS-TQ9200 Liquid Chromatography Mass Spectrometry (LC-MS/MS)
China's National Food Safety Standard "GB 31650-2019 Maximum Residue Limits for Veterinary Drugs in Foods" specifies the maximum residue limits (MRLs) of certain quinolone antibiotics in animal-derived food productsSelain itu, "GB 31658.17-2021 Standar Keamanan Pangan Nasional - Penentuan Tetrasiklin, Sulfonamides and Quinolones Residues in Foods of Animal Origin by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry" specifies the LC-MS/MS analytical method and corresponding limits of quantification (LOQs) for 13 quinolone antibiotics. This application note presents the successfully validated results for the analysis of 13 quinolone antibiotic residues in chicken meat using Wayeal's LCMS-TQ9200 triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) system.
Kata kunci:LC-MS/MS, kinolon, residu obat hewan, keamanan pangan.
Wayeal LCMS-TQ9200 Sistem Kromatografi Cairan-Tandem Mass Spectrometry
Metode Kromatografi Cairan
Kolom kromatografi: C18 3.0x100mm
Fase bergerak: A: 0,1% metanol asam formik, B: 0,1% larutan asam formik
Tingkat aliran: 0,4 ml/menit
Suhu kolom: 45°C
Volume injeksi: 3μL
Metode Spektrometri Massa
Tabel 1 Spektrometri Massa Parameter Sumber Ion
| Sumber Ion |
ESI, modus ion positif |
| Tegangan Sumber Ion |
5500V |
| Tingkat Aliran Gas Desolusi |
18000mL/menit |
| Tingkat Aliran Gas Nebulizer |
2000mL/menit |
| Tingkat Aliran Gas Tirai |
5000 mL/menit |
| Tingkat aliran gas tabrakan |
800μL/menit |
| Suhu Penghapusan |
450°C |
| Suhu Gas Tirai |
150°C |
Tabel 2 Parameter Spektrometri Massa untuk Setiap Senyawa
| Senyawa |
Q1 |
Q3 |
Potensi Dekluster (V) |
Energi tabrakan (V) |
| Asam oxolinic |
262.1 |
244* |
100 |
25 |
| 160 |
100 |
50 |
| Flumequine |
262.1 |
202 |
115 |
44 |
| 244.1* |
115 |
24 |
| Norfloxacin |
320.1 |
302.1* |
90 |
27 |
| 233.2 |
90 |
33 |
| Enoxacin |
321.2 |
234 |
100 |
38 |
| 303* |
100 |
30 |
| Ciprofloxacin |
332.2 |
231 |
100 |
49 |
| 288 |
100 |
25 |
| Pefloxacin |
334.1 |
316* |
110 |
29 |
| 233.2 |
110 |
35 |
| Lomefloxacin |
352.1 |
265.1* |
110 |
31 |
| 334 |
110 |
29 |
| Danofloxacin |
358.1 |
340.1* |
100 |
32 |
| 283.1 |
100 |
32 |
| Enrofloxacin |
360.2 |
316.1 |
110 |
27 |
| 245.1* |
110 |
38 |
| Ofloxacin |
362.1 |
318.3 |
75 |
25 |
| 261.2* |
75 |
34 |
| Marbofloxacin |
363.2 |
72.1* |
100 |
25 |
| 345.2 |
100 |
29 |
| Sarafloxacin |
386.1 |
299.1* |
110 |
38 |
| 342 |
110 |
27 |
| Difloxacin |
400.2 |
299.1 |
110 |
38 |
| 382.2 |
120 |
30 |
Catatan: Ion yang ditandai dengan * adalah ion kuantitatif
1Hasil percobaan.
1.1 Bentuk puncak
Penentuan 13 antibiotik quinolone selesai dalam waktu 11 menit.Semua senyawa menunjukkan respon sinyal yang kuat, memenuhi persyaratan untuk kuantifikasi eksperimental.
Gambar 1 Kromatogram dari 13 Quinolone Antibiotik
1.2. Jarak Liner
Jumlah larutan standar campuran quinolone yang tepat diencerkan secara berurutan untuk menyiapkan standar kalibrasi yang mencakup konsentrasi dari 2 hingga 500 ng/mL.Evaluasi linearitas menunjukkan persetujuan yang sangat baik dengan konsentrasi nominalKoefisien penentuan (R2) berkisar antara 0,9921 dan 0.9998, mengkonfirmasi linearitas yang memuaskan untuk semua komponen.
Tabel 3 Tabel kisaran linier
| Senyawa |
Jangkauan linier |
Koefisien korelasi linier R2 |
| Asam oxolinic |
2-500ng/mL |
0.9989 |
| Flumequine |
2-500ng/mL |
0.9988 |
| Norfloxacin |
2-500ng/mL |
0.9968 |
| Enoxacin |
2-500ng/mL |
0.9989 |
| Ciprofloxacin |
2-500ng/mL |
0.9982 |
| Pefloxacin |
2-500ng/mL |
0.9992 |
| Lomefloxacin |
2-500ng/mL |
0.9921 |
| Danofloxacin |
2-500ng/mL |
0.9969 |
| Enrofloxacin |
2-500ng/mL |
0.9998 |
| Ofloxacin |
2-500ng/mL |
0.9941 |
| Marbofloxacin |
2-500ng/mL |
0.9997 |
| Sarafloxacin |
2-500ng/mL |
0.9946 |
| Difloxacin |
2-500ng/mL |
0.9973 |
Gambar 2 Hasil kisaran linier untuk antibiotik quinolone terpilih
1.3Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantifikasi (LOQ)
Standar Keamanan Pangan Nasional GB 31658.17-2021, menentukan batas deteksi (MDL) 2μg/kg dan batas kuantifikasi (MQL) 10μg/kg. Dalam metode ini,semua senyawa target menunjukkan rasio sinyal ke kebisingan secara signifikan lebih dari 3 pada 2μg/kg dan 10 pada 10μg/kg, sepenuhnya sesuai dengan persyaratan sensitivitas yang ditentukan dalam standar nasional.
Tabel 4 Rasio sinyal ke kebisingan untuk batas deteksi dan kuantifikasi senyawa target
| Komposisi |
SNR (S/N) |
| 2μg/kg |
10μg/kg |
| Asam oxolinic |
111.26 |
359.11 |
| Flumequine |
59.64 |
244.73 |
| Norfloxacin |
70.16 |
392.57 |
| Enoxacin |
23.74 |
80.26 |
| Ciprofloxacin |
37.91 |
99.26 |
| Pefloxacin |
28.70 |
125.81 |
| Lomefloxacin |
48.54 |
165.84 |
| Danofloxacin |
105.74 |
348.10 |
| Enrofloxacin |
35.97 |
120.82 |
| Ofloxacin |
51.67 |
287.26 |
| Marbofloxacin |
190.11 |
399.38 |
| Sarafloxacin |
38.11 |
160.79 |
| Difloxacin |
25.85 |
149.29 |
Gambar 3 Kromatogram LOD/LOQ untuk Quinolone yang dipilih
1.4. pengujian presisi
Sebuah larutan standar campuran antibiotik quinolone pada tiga konsentrasi (10, 50, dan 100 ng/ ml) disuntikkan selama 6 kali untuk membandingkan waktu retensi dan variasi area puncak.Seperti yang ditunjukkan dalam tabel di bawah ini, semua senyawa quinolone yang diuji menunjukkan penyimpangan waktu retensi kurang dari 0,3% dan penyimpangan area puncak kurang dari 5%,sepenuhnya sesuai dengan persyaratan standar nasional RSD ≤15% untuk presisi.
Tabel 5 Pengujian presisi dari berbagai senyawa
Gambar 4 Kromatogram presisi dari senyawa yang dipilih
2Kesimpulan
Metode ini menggunakan sistem spektrometri massa kromatografi cair-tandem Wayeal LCMS TQ9200 untuk penentuan antibiotik quinolone dalam sampel ayam.Data eksperimental menunjukkan kinerja kromatografi yang sangat baik dengan bentuk puncak yang jelas dan tidak ada ekor untuk semua analitaMetode ini menunjukkan linearitas yang baik dengan koefisien korelasi (R2) melebihi 0,99 untuk semua kurva kalibrasi,dengan reproduksi yang sangat baik seperti yang dibuktikan oleh penyimpangan waktu retensi di bawah 0Analisis tiga batch sampel ayam yang disiapkan secara independen tidak menunjukkan residu antibiotik quinolone yang terdeteksi. These results confirm that the analytical method coupled with the Wayeal LC-MS/MS system is fully capable of meeting routine qualitative and quantitative detection requirements for the target analytes in test samples.
Pesan Anda harus antara 20-3.000 karakter!
