Penentuan Impuritas Nitrosamin dalam Tablet Hidroklorida Propranolol dengan Kromatografi Cair

Kata kunci: Propranolol, kromatografi cair kinerja tinggi, kotoran nitrosamin

1Instrumen dan Reagen

1.1 Daftar Konfigurasi Sistem HPLC

1.2 Reagen dan Solusi Standar

Tabel 2 Reagen dan Solusi Standar

1.3 Bahan percobaan dan peralatan bantu

Pembersih ultrasonik

Mesin pencampur vortex

2Metode percobaan

2.1 Persiapan larutan

2.1.1 2mol/L larutan natrium hidroksida: Ambil 4 g natrium hidroksida, larut dalam 50 ml air, dan aduk dengan baik.

2.1.2 Asam Acetonitrile-Air-Sulfurik (55:45:0.1) Campuran: Ambil 1,6 g natrium dodecil sulfat dan 0,31 g tetrabutylammonium dihydrogen phosphate, tambahkan 1 ml asam sulfat, 450 ml air, dan 550 ml acetonitrile. Sesuaikan pH 3.3 dengan larutan natrium hidroksida 2 mol/L, dan campurkan dengan baik.

2.1.3 Pelarut: Sama dengan fase mobile.

2.1.4 Solusi linier: Timbang dengan tepat jumlah standar referensi N-Nitroso-propranolol yang sesuai,larut dan diencerkan dengan fase mobile untuk mendapatkan larutan yang mengandung sekitar 200ng per 1mL sebagai larutan baku standarKemudian transfer dengan tepat volume yang tepat dari larutan stok ke dalam enam 100mL flask volumetric, diencerkan ke tanda dengan fase mobile,dan dicampur dengan baik untuk menyiapkan serangkaian kurva kerja standar dengan konsentrasi 00,8ng/mL, 1ng/mL, 2ng/mL, 3ng/mL, 4ng/mL, dan 6ng/mL.

2.1.5 Solusi Standar Referensi: Timbang dengan tepat jumlah standar referensi N-Nitroso-propranolol yang sesuai,larut dan diencerkan dengan fase mobile untuk menyiapkan larutan yang mengandung sekitar 2ng N-Nitroso-propranolol per 1 ml sebagai larutan standar referensi.

2.2 Persiapan Sampel

2.2.1 Solusi Sampel: beratkan dengan tepat jumlah yang tepat dari tablet propranolol hidroklorida bubuk halus, larut dan encerkan dengan fase bergerak untuk menyiapkan larutan yang mengandung sekitar 0.27 mg propranolol per 1 ml sebagai sampel larutan.

2.2.2 Keakuratan Solusi: secara akurat menimbang sekitar 297 mg tablet propranolol hidroklorida bubuk halus ke dalam kolob 100 ml.Tambahkan jumlah yang tepat dari larutan standar referensi N-Nitroso-propranolol, larut dan encerkan ke tanda dengan fase bergerak untuk menyiapkan sampel 100% yang ditambahkan. Campurkan dengan baik untuk mendapatkan larutan akurasi.

3Hasil percobaan.

3.1 Spesifisitas

Gambar 2 Kromatogram Spesifisitas

Catatan: Pelarut tidak mengganggu deteksi N-Nitroso-propranolol,dan puncak kromatografi dari kotoran lain dalam larutan uji juga tidak mengganggu penentuan kotoran N-Nitroso-propranolol.

3.2 Uji linier

Gambar 3 kurva standar dari N-Nitroso-propranolol impurity

Catatan: Hasil percobaan menunjukkan bahwa koefisien korelasi (R) dari kurva tes kotoran N-Nitroso-propranolol melebihi 0.999, memenuhi persyaratan pengujian.

3.3 Uji Kemungkinan Ulangi

Gambar 4 Kromatogram enam injeksi berulang untuk standar 2ng/mL

Tabel 3 Data enam injeksi berulang untuk 2ng/mL Standar

Catatan: Seperti yang ditunjukkan dalam tabel di atas, pengulangan waktu retensi N-nitroso-propranolol adalah 0,043%, dan pengulangan area puncak adalah 0, 464%, menunjukkan pengulangan yang baik.

3.4 Uji Keakuratan

Gambar 5 Kromatogram Keakuratan Tumpang tindih dari N-Nitroso-propranolol dalam Tablet

Tabel 4 Keakuratan Propranolol Hidroklorida Tablet (N-Nitroso-propranolol)

Catatan: Pemulihan N-Nitroso-propranolol dalam enam sampel berkisar dari 96,98% hingga 104,71%, dengan pemulihan rata-rata 101,38%.

3.5 Uji LOD

Gambar 6 Kromatogram uji N-Nitroso-propranolol pada konsentrasi standar 2ng/ml

Tabel 5 Data uji referensi N-Nitroso-propranolol pada konsentrasi standar 2ng/mL

Catatan: Berdasarkan data uji untuk standar referensi N-nitroso-propranolol pada konsentrasi 2ng/ml dalam tabel di atas,batas deteksi teoretis untuk N-nitroso-propranolol dihitung sebagai 0.151ng/mL menggunakan rasio sinyal-kebisingan 3: 1 sebagai kriteria batas deteksi.

3.6 Pengujian Tablet Merek

Gambar 7 Kromatogram pengujian tablet merek

Catatan: N-Nitroso-propranolol tidak terdeteksi pada tablet merek.

4Kesimpulan

A study on the nitrosamine impurity N-nitroso-propranolol in propranolol hydrochloride tablets was conducted in accordance with the FDA's recently published guidance document on establishing acceptable intake levels for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRI)Berdasarkan dokumen ini, nilai AI (Intake yang Dapat Diterima) dihitung sebagai 1500 ng/hari..Validasi metode dilakukan dengan menggunakan seri kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) Wayeal yang dilengkapi dengan detektor UV.Sampel tablet dianalisis menggunakan metode deteksi yang validasi.Semua data di atas sesuai dengan persyaratan farmakopei untuk instrumen.