Penentuan beberapa fosfat dalam makanan dengan cromatograph ion Wayeal

Catatan aplikasi ini memperkenalkan penentuan beberapa fosfat dalam makanan menurut Metode 2 GB 5009.256-2025 menggunakan sistem kromatografi ion Wayeal.

Asupan fosfat yang berlebihan dapat mengganggu metabolisme kalsium-fosfor tubuh, sehingga menyebabkan gangguan penyerapan mineral atau masalah kesehatan lainnya. Deteksi yang akurat membantu perusahaan secara ilmiah mengontrol penggunaan bahan tambahan, menyeimbangkan kualitas dan keamanan pangan, serta memberikan dukungan data untuk mengoptimalkan formulasi.

Kata kunci:Kromatografi ion, anion, makanan.

1. Instrumen dan Bupati

1.1 Daftar Konfigurasi Kromatografi Ion

Tabel 1 Daftar Konfigurasi Instrumen

1.2 Reagen dan Standar

Tabel 2 Daftar Reagen dan Standar

1.3 Bahan Percobaan dan Peralatan Penolong

Filter hidrofilik tipe jarum suntik kalengan (0,45μm)

Injektor (20mL)

2. Metode Eksperimen

2.1 Perlakuan Awal Sampel

Timbang 1-2g (akurat hingga 0,001g) sampel ke dalam tabung kolorimetri 50mL. Tambahkan 22,5mL larutan natrium hidroksida 100mmol/L. Campuran Vortex selama 1 menit, kemudian ekstrak secara ultrasonik pada suhu 80°C selama 30 menit, kocok setiap 5 menit untuk memastikan sampel terdispersi sempurna. Setelah dingin hingga suhu kamar, encerkan hingga 50mL dengan air ultra murni dan aduk hingga rata. Pindahkan seluruh larutan ke dalam tabung centrifuge 50mL dan centrifuge dengan kecepatan 8.000 putaran/menit selama 5 menit. Ukur 5mL supernatan ke dalam tabung kolorimetri 50mL lainnya, tambahkan 1mL asam nitrat 30%, dan vorteks hingga tercampur. Tempatkan tabung dalam penangas air pada suhu 90 °C± 5 °C dan panaskan selama 60 menit. Setelah dipanaskan, keluarkan tabung dan dinginkan hingga suhu kamar dalam penangas air dingin. Terakhir, encerkan hingga tanda batas dengan air dan aduk rata.

Pipet 2mL larutan ke dalam tabung centrifuge 10mL, lalu encerkan hingga tanda batas dengan air ultra murni. Tempatkan tabung dalam centrifuge berpendingin dan centrifuge pada suhu 4 °C dan 8.000 putaran/menit selama 5 menit. Kumpulkan supernatan dan lewati melalui 0,45μm membran penyaring. Kemudian, ambil volume filtrat yang sesuai untuk analisis instrumental.

Catatan: Dalam metode standar asli, 45mL larutan natrium hidroksida 50mmol/L ditambahkan secara terpisah. Untuk pengujian ini, untuk memudahkan penyesuaian volumetrik karena jumlah lonjakan yang lebih besar, larutan ekstraksi dimodifikasi menjadi 22,5mL larutan natrium hidroksida 100mmol/L yang ditambahkan secara terpisah. Modifikasi ini tidak mempengaruhi validitas hasil eksperimen.

2.2 Kondisi Eksperimen

Tabel 3 Kondisi Uji Anion

3. Hasil Percobaan

3.1 Kromatografi Standar

Penentuan banyak fosfat dalam makanan menurut Metode 2 GB 5009.256-2025 diselesaikan dalam waktu 30 menit. Hasil pengujian menunjukkan linearitas dan pengulangan linier yang baik, batas deteksi dan kuantifikasi yang sangat baik, presisi yang memuaskan, pengulangan sampel yang kuat, paralelisme sampel yang andal, pengulangan sampel berduri yang konsisten, dan tingkat pemulihan yang sangat baik. Semua indikator kinerja memenuhi persyaratan yang ditentukan dalam GB 5009.256-2025 untuk penentuan banyak fosfat dalam makanan.

Kromatogram Tumpang Tindih Kurva Standar

3.2 Rentang Linier

Ambil larutan standar secukupnya dan encerkan untuk menyiapkan kurva kalibrasi. Penyimpangan antara hasil deteksi linier dan konsentrasi yang diketahui lebih kecil dari simpangan maksimum yang diperbolehkan, dengan nilai R lebih besar dari 0,999, menunjukkan linearitas yang sangat baik untuk setiap komponen.

Tabel 4 Tabel Rentang Linier Ion Fosfat

Hasil Linearitas Ion Fosfat

3.3 Uji Pengulangan Linearitas

Kromatogram Uji Pengulangan untuk Kurva Standar Titik Nilai Rendah S1 dengan 7 Suntikan Berturut-turut

Kromatogram Uji Pengulangan untuk Titik Nilai Menengah Kurva Standar S4 dengan 7 Suntikan Berturut-turut

Kromatogram Uji Pengulangan untuk Kurva Standar Titik Bernilai Tinggi S7 dengan 7 Suntikan Berturut-turut

Data Uji Pengulangan untuk Kurva Kalibrasi

3.4 Tes LOD

Kromatogram Uji LOD

Data Uji LOD

3.5 Uji Presisi

Kromatogram Tumpang Tindih dari Dua Uji Independen

Data Uji Presisi

3.6 Kromatogram Uji Sampel Kosong

Kromatogram Uji Sampel Kosong

Data Uji Sampel Kosong

3.7 Uji Paralelisme dan Pengulangan Sampel Kromatogram

Kromatogram Overlay Sampel Paralel Udang Beku 1 (8 Suntikan)

Kromatogram Tumpang Tindih Sampel Paralel Udang Beku 2 (8 Suntikan)

Data Uji Udang Beku

3.8 Contoh Uji Spiking dan Pengulangan Spike

Kromatogram Tumpang Tindih 50% Udang Beku Berduri (8 Suntikan)

Data Uji Pengulangan Udang Beku Tingkat Spike 50%.

Kromatogram Tumpang Tindih Udang Beku dengan Tingkat Spike 100% (8 Suntikan)

Data Uji Repeatabilitas Udang Beku dengan Tingkat Spike 100%.

Kromatogram Tumpang Tindih Udang Beku dengan Tingkat Lonjakan 150% (8 Suntikan)

Data Uji Reproduksibilitas Udang Beku dengan Tingkat Spike 150%.

Data Uji Spiking Udang Beku

Berdasarkan data yang diberikan, puncak kromatografi menunjukkan bentuk yang baik, dan koefisien korelasi linier semuanya lebih besar dari 0,999. Penentuan fosfat dalam makanan dilakukan menggunakan kolom kromatografi hidrogen-hidroksida NovaChrom (HS-9A-PP, 4 × 250mm, 9μm), dengan mengacu pada metode kedua yang ditentukan dalam GB5009.256-2025 untuk penentuan banyak fosfat dalam makanan. Hasil eksperimen menunjukkan bahwa metode kedua menunjukkan linearitas dan reproduktifitas linier yang sangat baik. Ini juga menunjukkan batas deteksi yang luar biasa (0,003g/kg), batas kuantifikasi (0,009g/kg), dan presisi. Metode ini menunjukkan kemampuan pengulangan yang baik, paralelisme sampel, dan tingkat pemulihan lonjakan yang sangat baik. Batas deteksi dan batas kuantifikasi keduanya jauh di bawah persyaratan standar masing-masing 0,05g/kg dan 0,1g/kg. RSD area puncak untuk pengulangan sampel berkisar antara 0,515% hingga 0,934%. Perbedaan mutlak antara dua penentuan independen yang diperoleh dalam kondisi pengulangan sampel adalah 0,37% dari rata-rata aritmatika. Dalam pengujian presisi, perbedaan absolut antara dua penentuan independen yang diperoleh dalam kondisi pengulangan adalah 0,06% dari rata-rata aritmatika, yang tidak melebihi persyaratan standar sebesar 15%. Tingkat kesembuhan berkisar antara 92,57% hingga 102,15%. Metode ini memenuhi persyaratan GB5009.256-2025 untuk penentuan banyak fosfat dalam makanan.

4. Kesimpulan

Analisis ini dilakukan dengan menggunakan kromatografi ion Wayeal untuk menentukan banyak fosfat dalam makanan menurut Metode 2 GB5009.256-2025. Metode ini memungkinkan penghitungan kandungan fosfat dalam makanan secara akurat, memverifikasi kepatuhannya terhadap standar nasional (seperti GB 5009.256-2025). Hal ini membantu mencegah perusahaan melampaui batas bahan tambahan yang diizinkan dan mendukung integritas sistem peraturan keamanan pangan.