Analisis Advantame dalam Makanan dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Analisis Advantame dalam Aditif Makanan

Percobaan ini dilakukan dengan mengacu pada "GB 1886.377-2024 Standar Keamanan Pangan Nasional - Aditif Makanan Advantame", dengan menggunakan sistem Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC) Seri LC3200 Wayeal yang dilengkapi dengan detektor UV untuk analisis. Hasil percobaan menunjukkan kesesuaian sistem yang sangat baik, dengan bentuk puncak yang baik untuk asam benzoat dan advantame. Tidak ada puncak lain di sekitar puncak target, dan jumlah pelat teoritis yang tinggi mengkonfirmasi kepatuhan terhadap semua persyaratan pengujian. Koefisien korelasi linier melebihi 0,999. Percobaan menunjukkan pengulangan yang sangat baik, dengan deviasi standar relatif (RSD) waktu retensi sebesar 0,027% untuk asam benzoat dan 0,049% untuk advantame, dan RSD area puncak masing-masing 0,184% dan 0,133%. Batas deteksi teoretis adalah 0,066mg/L untuk asam benzoat dan 0,113mg/L untuk advantame. Tidak ada analit target yang terdeteksi dalam pengujian sampel. Semua data analitik memenuhi persyaratan kinerja instrumental yang ditentukan dalam metodologi farmakope.

Kata Kunci: Advantame, kromatografi cair kinerja tinggi, detektor UV.

1. Metode Percobaan

1.1 Konfigurasi Instrumen

Tabel 1 Daftar Konfigurasi Sistem HPLC

1.2 Bahan Percobaan dan Peralatan Tambahan

Asetonitril: Tingkat kromatografi

Standar asam benzoat

Standar advantame

1.3 Kondisi Pengujian

Tabel 2 Kondisi Analisis HPLC

1.4 Persiapan Larutan

1.4.1 Larutan Standar Internal

Timbang dengan akurat 40mg asam benzoat, larutkan dalam pelarut campuran air-asetonitril, dan encerkan secara tepat hingga 50mL.

1.4.2 Larutan Standar

Timbang dengan akurat 40mg advantame, larutkan dalam pelarut campuran air-asetonitril, dan encerkan secara tepat hingga 50mL untuk menyiapkan larutan stok standar 0,8mg/mL. Pipetkan secara tepat 8mL, 9mL, 10mL, 11mL, dan 12mL larutan stok standar ke dalam lima labu volumetrik terpisah. Tambahkan 5mL larutan standar internal ke setiap labu, kemudian encerkan hingga 50mL dengan pelarut campuran air-asetonitril untuk menyiapkan larutan kerja standar pada konsentrasi 0,128mg/mL, 0,144mg/mL, 0,160mg/mL, 0,176mg/mL, dan 0,192mg/mL untuk konstruksi kurva kalibrasi.

1.4.3 Persiapan Sampel

Timbang dengan akurat 40mg sampel uji, larutkan dalam pelarut campuran air-asetonitril, dan encerkan secara tepat hingga 50mL. Pipetkan 10mL larutan yang disiapkan ke dalam labu volumetrik, tambahkan 5mL larutan standar internal, dan encerkan hingga 50mL dengan pelarut campuran air-asetonitril. Saring larutan melalui filter membran untuk pengujian.

2. Hasil dan Diskusi

2.1 Kesesuaian Sistem

Gambar 1 Kromatogram Uji Kesesuaian Sistem

Tabel 3 Data Uji Kesesuaian Sistem

Catatan: Seperti yang ditunjukkan tabel di atas, uji kesesuaian sistem menunjukkan bentuk puncak yang sangat baik untuk asam benzoat dan advantame, dengan faktor ekor di bawah 1,2. Resolusi melebihi 1,5, dan jumlah pelat teoritis yang tinggi sepenuhnya memenuhi persyaratan metode analitik.

2.2 Uji Kurva Kalibrasi

Gambar 2 Laporan Uji Kurva Kalibrasi Advantame

Catatan: Hasil percobaan menunjukkan linearitas yang sangat baik untuk kuantifikasi advantame, dengan koefisien korelasi (R²) melebihi 0,999, yang memenuhi persyaratan percobaan.

2.3 Pengujian Pengulangan

Gambar 3 Kromatogram Uji Pengulangan Enam Injeksi

Tabel 4 Data Uji Pengulangan Asam Benzoat (6 Injeksi)

Tabel 5 Data Uji Pengulangan Advantame (6 Injeksi)

Catatan: Dari data pada tabel di atas, pengulangan waktu retensi asam benzoat dan advantame adalah 0,027% dan 0,049%, dan pengulangan area puncak masing-masing adalah 0,184% dan 0,133%, yang menunjukkan pengulangan yang baik.

2.4 Pengujian Batas Deteksi

Gambar 4 Kromatogram Larutan Standar Asam Benzoat 0,8mg/L dan Advantame 1,28mg/L

Tabel 6 Hasil Uji untuk Larutan Standar Asam Benzoat 0,8mg/L dan Advantame 1,28mg/L yang mengandung

Catatan: Menurut data uji sampel standar pada tabel di atas, dengan konsentrasi asam benzoat 0,8mg/L dan konsentrasi advantame 1,28mg/L, batas deteksi teoretis untuk asam benzoat dan advantame, dihitung berdasarkan rasio sinyal-ke-noise 3 kali lipat, adalah 0,066mg/L dan 0,113mg/L, masing-masing.

2.5 Pengujian Minuman Merek A

Gambar 5 Kromatogram Minuman Merek A

Catatan: Tidak ada advantame yang terdeteksi dalam minuman merek yang diuji.

3. Kesimpulan

Percobaan ini dilakukan sesuai dengan “GB 1886.377-2024 Standar Keamanan Pangan Nasional - Aditif Makanan Advantame" dengan menggunakan sistem kromatografi cair kinerja tinggi Wayeal LC3200, dilengkapi dengan detektor UV untuk analisis. Hasil percobaan menunjukkan kesesuaian sistem yang sangat baik, dengan bentuk puncak yang baik untuk asam benzoat dan advantame. Tidak ada puncak lain di sekitar puncak target, dan jumlah pelat teoritis yang tinggi mengkonfirmasi kepatuhan terhadap semua persyaratan pengujian. Koefisien korelasi linier melebihi 0,999. Percobaan menunjukkan pengulangan yang sangat baik, dengan deviasi standar relatif (RSD) waktu retensi sebesar 0,027% untuk asam benzoat dan 0,049% untuk advantame, dan RSD area puncak masing-masing 0,184% dan 0,133%. Batas deteksi teoretis adalah 0,066mg/L untuk asam benzoat dan 0,113mg/L untuk advantame. Tidak ada analit target yang terdeteksi dalam pengujian sampel. Semua data analitik memenuhi persyaratan kinerja instrumental yang ditentukan dalam metodologi farmakope.